1963年，在首部电影《宝莲灯》中反串男角；1964年主演文艺片《情人石》获得国际独立制片人协会“金武士奖”。1966年，主演胡金铨执导的中国新派武侠电影开山之作《大醉侠》。1971年郑佩佩结婚宣告退出娱乐圈，1992年复出影坛；同年参演周星驰电影《唐伯虎点秋香》饰演“华夫人”。2001年演出李安的《卧虎藏龙》 “碧眼狐狸”一角，获得香港电影金像奖最佳女配角奖项以及角逐奥斯卡金像奖。2013年，在黄晓明主演的电视剧《精忠岳飞》里饰演“岳母”。